ANALISI DEI FARMACI II

Prof. Maurizio Botta

Tel. 0577/234306 - E-mail: BOTTA@UNISI.IT

Programma:

Estrazione ed analisi di un principio biologicamente attivo: Metodologie per estrarre un principio attivo, Soxhlet. Solubilità, fattori che influenzano la solubilità, scelta del solvente. Esame sistematico di una sostanza organica. Smistamento di una miscela di sostanze organiche secondo la sistematica di M. Standinger. Purificazione del Principio attivo: Cromatografia: Teoria generale, efficienza di un sistema cromatografico, risoluzione, sistemi di rilevazione.

Cromatografia di assorbimento solido - liquido, colonna cromatografica, cromatogramma. Scelta dell’absorbente e del solvente.. Cromatografia per ripartizione liquido-liquido: colonna, cromatografia su carta, ascendente e discendente, monodimensionale e bidimensionale. Cromatografia su strato sottile. Cromatografia per scambio ionico: classificazione degli scambiatori ionici, teoria dello scambio ionico, studi comparati di differenti scambiatori, cromatografia su colonna, scelta dello scambiatore, scelta della colonna, riempimento della colonna. Cromatografia con fase mobile gassosa: principi della gas-cromatografia, gas-cromatografo. Fattori essenziali alla tecnica cromatografica: gas di trasporto, purezza , portata, misura della portata; temperatura dell’iniettore, temperatura della colonna cromatografica, influenza della temperatura sul potere separatore, programmazione della temperatura. Fase stazionaria, liquido di ripartizione, preparazione della fase stazionaria per la cromatografia di ripartizione gas-liquido, preparazione della colonna cromatografica; rilevatore e conducibilità termica, a ionizzazione di fiamma, a cattura di elettori. Interpretazione di un cromatogramma, analisi qualitativa, uso di standards, tempo di ritenzione assoluto e relativo, identificazione mediante modifiche chimiche. Accoppiamento gas-cromatografo/spettometro di massa. Recenti sviluppi nella separazione di enantiomeri mediante tecniche gas cromatografiche. Fasi stazionarie chirali per gas cromatografia. Analisi quantitativa: misura delle superfici dei picchi, taratura diretta, metodo della standardizzazione interna. High-Performance Liquid Chromatography (HPLC): teoria, strumento, rilevatori, scelta delle condizioni operative: pressione colonna (cromatografia diretta e inversa), solvente. Cromatografia analitica, preparativa. Recenti sviluppi nella separazione di enantiomeri mediante tecniche HPLC. Fasi stazionarie chirali per HPLC. Cristallizzazione: scelta del solvente, filtrazione ed essiccamento, cristallizzazione frazionata. Sublimazione. Punto di fusione: considerazioni teoriche, punto di fusione come criterio di purezza di una sostanza solida. Apparecchi per la determinazione del punto di fusione. Definizione della tensione del vapore, ebollizione, distillazione, distillazione frazionata, distillazione a pressione ridotta, distillazione in corrente di vapore. Colonna di rettifica, a spirale e a piatti. Ricerca qualitativa degli elementi: Riconoscimento di carbonio e idrogeno; Saggio di Lassaigne. Riconoscimento dello zolfo e degli alogeni. Analisi elementare di una sostanza organica (C,H,O,N). Determinazione del peso molecolare mediante spettrometria di massa (E.I., F.A.B., C.I.). Saggi di riconoscimento di carattere generale: Ferrox, formazione di un colorato azoico, Friedel-Crafts, Le Rosen. Saggio del bromo, saggio di Boiyer, saggio con ozono. Saggi di riconoscimento dei gruppi funzionali e preparazione dei derivati cristallini. Acidi carbossilici, anidridi degli acidi carbossilici, esteri, ammidi e nitrili, composti carbonilici, alcooli e fenoli ammine, alogeno-derivati, nitrocomposti, eteri, carboidrati, idrocarburi, aminoacidi, sostanze soforate. Indice di rifrazione, rifrattometro di Abbé. Polarimetria: generalità; cenni di stereochimica, configurazione relativa ed assoluta, purezza ottica, analisi conformazionale. Rotazione del piano della luce polarizzata, polarimetro. Effetto Cotton, dicroismo circolare e dispersione ottica rotatoria. Uso della Farmacopea Ufficiale Italiana.

Testi Consigliati:

F. Chimenti - Identificazione sistematica di composti organici. Editoriale Grasso.

L. Schriner, D.Y. Cortin, T.C. Merill, R.C. Fuson - The Systematica Identification of Organic Compounds - Wiley.

C. Javarone, P. Esposito, C. Trogolo - Analisi Organica Qualitativa- La Goliardica.

G.P. Cartoni, G.Goretti - Cromatografia - La Goliardica.

B. Holmstedt, H. Franck, B. Testa - Chirality and Biological Activity Alan R. Liss, New York.

A.M. Krstulovic - Chiral Separations bt HPLC applications to pharmaceutical compounds. Elis Horwood.